Mikrobiologický ústav - domovská stránka

Obsah

• Úvodní stránka
• Psali o nás
• Kontakty
• Aktuality
• Vědecký program
• Zaměstnanci
• Vědecké publikace
• Výroční zprávy
• Knihovna
• Výuka
• Volná místa
• Inkubátor pro řasové biotechnologie
• Projekt Biopharm
• Historie Opatovického mlýna
• Intranet MBU Praha
• Intranet MBU Třeboň

Laboratoř buněčných cyklů

Výzkum laboratoře se zaměřuje na regulaci buněčného cyklu řas, charakterizovanou násobným dělením. Používanými modelovými organismy jsou Chlamydomonas reinhardtii a Scenedesmus quadricauda (Chlorophyta). Kultivace synchronních řasových kultur a studium jejich buněčných cyklů má v Třeboni 35-ti letou tradici.

Současné cíle jsou tyto:

1. Dělení chloroplastů během buněčného cyklu zelených řas
2. Mechanismus vzájemné regulace mezi velikostí buňky a dělením
3. Aktivita cyklin dependentních kináz a CDK komplexy v průběhu buněčného cyklu
4. Expression and localization of CDKs on a molecular level

V rámci výzkumu byly vyvinuty následující metody:

1. Synchronizace řasových kultur
   Zachleder V., Šetlík I.(1990): Timing of events in overlapping cell reproductive sequences and their mutual interactions in the alga Scenedesmus quadricauda. Journal of Cell Science 97: 631-638.
2. Charakteristika postupu buněčného cyklu:
   1. analýza obsahu RNA a DNA a načasování DNA replikace:
      Zachleder V.(1986): Optimization of nucleic acids assay in green and blue-green algae: Extraction procedures and the light-activated reaction for DNA. Arch. Hydrobiol. (Suppl. 67) Algolog. Stud. 36: 313-328.
   2. stanovení křivek dosažení komitmentu
      Zachleder V., Schläfli O., Boschetti A. (1997): Growth-controlled oscillation in activity of histone H1 kinase during the cell cycle of Chlamydomonas reinhardtii (Chlorophyta). Journal of Phycology 33: 673-681.
      Vítová M., Zachleder V. (2005): Points of commitment to reproductive events as a tool for analysis of the cell cycle in synchronous cultures of algae. Folia Microbiologica: in press.
   3. stanovení počtu jader pomocí fluorescenčních barviv SYBR Green I a DAPI
      Zachleder V.(1986): Nuclei stained by SYBR Green I (left) and by DAPI (right) in Scenedesmus quadricauda
      Vítová M., Hendrychová J., Cepák V., Zachleder V.(2005): Visualization of DNA containing structures in Chlamydomonas reinhardtii and other species of Chlorophyta, Rhodophyta and Cyanophyta using SYBR Green I dye. Folia Microbiologica: in press.
      Zachleder V., Cepák V.(1987): Visualization of DNA containing structures by fluorochrome DAPI in those algal cells which are not freely permeable to the dye. Arch. Hydrobiol. (Suppl. 78) Algolog. Stud. 47: 157-168.
3. Stanovení aktivity cyklin dependentních kinas in vitro
   Bišová K., Vítová M., Zachleder V.(2000): The activity of total histone H1 kinases is related to growth and commitment points while the p13(suc1)-bound kinase activity relates to mitoses in the alga Scenedesmus quadricauda. Plant physiology and biochemistry 38: 755-764.
4. Stanovení aktivity jednotlivých komplexů CDK v polyakrylamidovém gelu
5. Jaderná transformace Chlamydomonas za použití skleněných kuliček
   Pacanovská M.(2003): Construction of plasmid with E.coli recA⁺ gene to increase frequention of homologous recombination in Chlamydomonas reinhardtii. MSc. thesis. Comenius University, the Faculty of Natural Sciences, Bratislava, Slovak Republic.
   Slaninová M., Fritsche L., Pacanovská M., Fuseková M., Treuner G., Vlček D., Mages W.(2004): New approaches to improve homologous recombination in Chlamydomonas reinhardtii. In book of European Environmental Mutagen Society (Maastricht, the Netherlands).
6. Fluorescenční mikroskopie (Olympus fluorescenční mikroskop BX51 s připojenou CCD kamerou, Nomarski (DIC) a fázový kontrast)
   Vítová M., Hendrychová J., Cepák V., Zachleder V.(2005): Visualization of DNA containing structures in Chlamydomonas reinhardtii and other species of Chlorophyta, Rhodophyta and Cyanophyta using SYBR Green I dye. Folia Microbiologica: in press.
   Hendrychová J., Vítová M., Bišová K., Wiche G., Zachleder V.(2002): Plectin-like proteins are present in cells of Chlamydomonas eugametos (Volvocales). Folia Microbiologica 47: 535-539.